核酸蛋白互作（RNA/DNA pull down、CHIRP-MS）服務(wù)

核酸蛋白互作（RNA/DNA pull down、CHIRP-MS）服務(wù)
（DH1008）

一、服務(wù)介紹
       核酸蛋白互作（RNA/DNA pull down、CHIRP-MS）用于目的RNA或DNA的互作蛋白驗(yàn)證或篩選，這三種技術(shù)是捕獲RNA/DNA-蛋白復(fù)合體的*常用方法，結(jié)合western-blot實(shí)驗(yàn)可以驗(yàn)證某種蛋白是否與目的RNA/DNA互作，結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)可以高通量鑒定與RNA/DNA結(jié)合的目的蛋白。
       RNA/DNA pull down是研究體外條件下RNA或DNA與蛋白互作的重要技術(shù)。該技術(shù)通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄目的RNA的一部分或全長(zhǎng)，用生物素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，再與鏈霉親和素磁珠孵育使之固定在磁珠上，用以“pull down”互作蛋白，純化的產(chǎn)物蛋白經(jīng)特定抗體的western-blot實(shí)驗(yàn)，可驗(yàn)證某種蛋白與目的RNA/DNA是否有相互作用；純化的蛋白經(jīng)質(zhì)譜鑒定，即可篩選到與目的RNA結(jié)合的蛋白。
       CHIRP-MS是研究體內(nèi)條件下RNA與蛋白互作的技術(shù)。該技術(shù)在特定時(shí)間點(diǎn)用甲醛交聯(lián)等方式固定細(xì)胞內(nèi)RNA與蛋白及核酸的互作復(fù)合物，再利用生物素標(biāo)記的探針及鏈霉親和素磁珠純化出與RNA結(jié)合的蛋白及核酸的復(fù)合物，分離產(chǎn)物中的蛋白質(zhì)做質(zhì)譜鑒定，即可篩選出與目的RNA結(jié)合的蛋白。
 
二、服務(wù)內(nèi)容及價(jià)格

 
三、客戶(hù)提供
1、目的基因、目的蛋白信息。（包括物種、序列或者ID，保密文件除外）
2、細(xì)胞株及培養(yǎng)信息
3、待測(cè)蛋白信息及檢測(cè)所用蛋白抗體
4、相關(guān)文獻(xiàn)（可選）。
 
四、服務(wù)流程
1）載體構(gòu)建GST-靶蛋白融合表達(dá)載體
2）GST-靶蛋白表達(dá)
3）WB檢測(cè)蛋白融合情況
4) 細(xì)胞裂解，獲取總蛋白裂解液
5)  GST-pull down調(diào)取互作結(jié)合蛋白
6） 蛋白純化
7） 數(shù)據(jù)分析及Result Figure處理
 
五、提交給客戶(hù)結(jié)果
1、原始數(shù)據(jù)、結(jié)果圖片（包括Input、陽(yáng)性及陰性對(duì)照結(jié)果）；
2、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告（包括詳細(xì)的材料與方法）；
3、SCI標(biāo)準(zhǔn)Result Figure。
 
六、服務(wù)項(xiàng)目說(shuō)明
1.實(shí)驗(yàn)周期：具體需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況而定。
2.對(duì)實(shí)驗(yàn)有特殊要求，請(qǐng)另詢(xún)價(jià)。
3.雙方簽訂合同后，收取50%首付后啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。